实验步骤

      1.二甲苯中37℃脱蜡2次，15min/次。

      2.无水乙醇浸泡2次，每次3min。

      3.95%乙醇浸泡2次，每次3min。

      4.PBS浸泡一次，3min。

      5.2%DEPC水室温下浸泡10min。

      6.PBS浸泡10min。

      7.0.2mol/L HCl浸泡30min。

      8.PBS浸泡2次，每次3min。

      9.滴加蛋白酶K（15ug/ml），37℃孵育15min。

      10.0.1%甘氨酸处理5min。

      11.4%多聚甲醛再次固定10min。

      12.PBS清洗2次，每次5min。

      13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min。

      14.SSC清洗2次，每次5min。

      15.滴加预杂交液，上面盖封口膜，使预杂交液不会干掉，随后放入湿盒，40℃孵育1-2h。