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蛋白质染色实验

      凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便且快捷,而银染法具有相当高的灵敏度,能用于检出更少量的蛋白质。


实验材料

      蛋白质


试剂、试剂盒

     聚丙烯酰胺   凝胶固定液   染色液   脱色液


仪器、耗材

      滤纸   培养箱


实验步骤

      1.  将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以3~5倍体积的固定液覆盖,在旋转摇床中缓慢揺动2 h。
 


      2.  倾去固定液,以考马斯亮蓝染色液覆盖凝胶,并缓慢摇动4 h。


      3.  倾去染色液,用约50 ml 固定液冲洗凝胶。
 



      4.  倾去固定液,以脱色液覆盖凝胶,缓慢摇动2 h,倾去脱色液,再加入新脱色液同时至获得蓝色条带及干净的背景。凝胶可放置在乙酸或水中保存。


      5.  需要时,给凝胶拍照。


 

      6.  另外,也可将凝胶放在两张Whatman 3MM 滤纸上,顶上盖上塑料保鲜膜。在常规的凝胶干燥机中于80℃干燥1~2 h。


此文转载来源:丁香通



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