1、感受态细胞的制备

      （6）7000g，4℃，离心5min收集细胞。

      （7）用25ml预冷50mmol/L CaCl2 溶液重悬细胞，冰浴30min。

      （8）6000g，4℃，离心5min收集细胞。

      （9）用4ml预冷100mmol/L CaCl2 溶液重悬细胞。

      （10）加入1ml甘油混匀，100ul/冻存管分装，-80℃保存备用。

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