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扫描电镜之样品干燥,高手有这三大招!

扫描电镜观察样品要求在高真空中进行。无论是水或脱水溶液,在高真空中都会产生剧烈地汽化,不仅影响真空度、污染样品,还会破坏样品的微细结构。因此,样品在用电镜观察之前必须进行干燥。小编汇总了以下几种干燥方法并作出对比。

    1.简述
    本次介绍的干燥方法主要有:空气干燥法、临界点干燥法、冰冻干燥 ;
    

干燥方法优缺点

空气干燥优点: 简便易行、节省时间

             缺点:由于脱水剂挥发时表面张力的作用,组织块会产生收缩变形


     临界点干燥优点: 较好地保存样品的微细结构;操作较方便, 快速2~3小时即可完成,常用

                缺点:需要特殊仪器设备---临界点干燥仪。

含水样品直接冷冻干燥优点:无需脱水,不会使样品收缩,较早使用的方法

                                缺点:花费时间长,消耗液氮多,易产生冰晶损伤,未被广泛应用.


样品脱水后冷冻干燥优点: 可减少冰晶损伤,且干燥时间短

                             缺点:有机溶剂对样品成分有抽提作用,造成部分内含物丢失。

                             

                                                      (实拍图)

2.空气干燥法

基本描述:将经过脱水的样品,让其暴露在空气中使脱水剂逐渐挥发干燥 ,也可直接(不脱水)放在干燥器中干燥。

     常用方法
     方法1:单固定或双固定→脱水→样品置于100%的脱水剂中→在空气中自然干燥;

     方法2:固定→(组织导电处理)→浸泡在缓冲液与乙醚的1:1中5min→空气干燥;

     方法3:单固定或双固定→乙醇脱水→浸没于六甲基二硅胺烷HMDS中二次每次15min→通风厨干燥1h

     3.临界点干燥法(CPD: critical point dryer) 
     基本含义:临界点干燥法是利用物质在临界状态时,其表面张力等于零的特性,使样品的液体完全汽化,并以气体方式排掉,来达到完全干燥的目的。

     基本概念:临界点:物质的气态和液态两相之间达到相同密度、成为均一流体时的温度和压力的总称。此时的温度称为临界点温度,压力称为临 界点压力。
     中间剂:把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。

     常用干燥剂
                      
     常用中间剂:
     中间剂:把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。
     试剂:醋酸(异)戊酯、丙酮

     干燥过程:固定脱水→转入中间液→移至样品室→用液体CO2置换醋酸异戊酯 →CO2汽化排气→干燥

     CO2临界点干燥器工作原理
                       
     临界点干燥失败(不彻底)的原因:
     (1) 脱水不彻底
     (2) 醋酸异戊酯反流
     (3) 样表粘有过多醋酸异戊酯
     (4) 样品量过多
     (5) 样品室温度高,注入CO2困难注入CO2量太少
     (6) 样品室漏气

     4.冰冻干燥
     基本描述:将经过冷冻的样品置于高真空中,通过升华除去样品中的水分或脱水剂的过程.

     含水样品直接冷冻干燥常规步骤: 取材→固定→冷冻保护处理→快速冷冻→升华(10-2乇)干燥→装台镀膜

     样品脱水后的冷冻干燥基本描述:样品用乙醇或丙酮脱水后过渡到某些易挥发的有机溶剂中,然后连同这些溶剂一起冷冻并在真空中升华而达到干燥。

     5.成功案例展
     最后附上我们的扫描电镜成功案例
            

       

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