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cDNA文库构建

概述 cDNA文库是以特定的组织或细胞mRNA为模板,逆转录形成的互补DNA(cDNA)与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群,这样包含着细胞全部mRNA信息

DNA纯化实验

DNA 纯化可以:( 1 )获得高纯度的 DNA ;( 2 )浓缩 DNA ;( 3 )用于测序、遗传信息分析等分子生物学应用。 PCR 清洁试剂盒纯化法 实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合 DNA ,又

基因定点突变step by step

本文先讲最简单的一个点的定点突变技术,其它较长片段的突变,删除,插入技术以后会慢慢奉上: 在做实验之前,我们首先要搞清楚实验的目的和实验的原理。 实验的目的应该比较

利用PCR分析酵母菌落

用 PCR 分析酵母菌落时,无需纯化 DNA 。本方案以单个酵母菌落的粗裂解液作为 PCR 扩增的模板,来确定 YAC 中是否携带目的 DNA 序列。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译

真核细胞基因组提取

一 . 实验目的及背景 高等动物,高等植物的基因组相当庞大,如人类细胞基因组由 30 亿个碱基对组成,果蝇基因组有 1.4 × 108 个碱基对,水稻基因组有 1.4 × 109 个碱基对。真核细胞基

基因克隆:高效感受态细胞制作

方法一 A 液: 1M , MnCl2 : B 液: 1M , HEPES , pH=6.2-6.8 ,用无菌水配,配后不需灭菌; C 液 称取 CaCl2 0.10g , KCl 1.18g ,全部转入细口试剂瓶,然后加入 46ml 三蒸水,轻轻振荡使所有组

SNP实验标准操作规程

一、原理 SNP (Single Nucleotide Polymorphism) 即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性 (Polymorphism) 。据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个 SNP ,无论

基因合成实验

获得一段特需列的最直接的方法就是化学合成。本方案是利用成对的寡核苷酸,通过其 3 ’端的退火而生成一短的双链区,寡核苷酸既作为模板,又起引物的作用,长达 400 bp 的所需片

DNA斑点和狭线印迹实验

斑点和狭线印迹是一种将混合的未经分离的面定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交分析的简单技术。用来检测被印迹的 1DNA 制品中靶序列的相对丰度。 多样抽滤法 实验材料 DNA 试剂、

DNA电泳(agarose胶)

一、试剂与材料: 1 、 琼脂糖 2 、 电泳缓冲液( 1 × TAE ) 3 、 10mg/ml 溴化乙锭 4 、 上样缓冲液 5 、 电泳仪和水平电泳漕 6 、 透射紫外灯 7 、 胶带纸 二、操作方法 按 1 ~ 2% 的琼脂糖

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