二、菌落制备主要环节

（三）连接

      将回收的PCR产物连接入pGL3-Basic载体中，反应体系如下：

      T4 连接酶                      1uL

      5×buffer                       1uL

      酶切质粒（50ng）              _ul

      酶切DNA片段（100ng）        _uL

      DDW                         20uL

      * 16℃连接8-10h，或者室温连接10min。

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