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质粒的制备、提取五

二、菌落制备主要环节

(三)连接

      将回收的PCR产物连接入pGL3-Basic载体中,反应体系如下:

      T4 连接酶                      1uL

      5×buffer                       1uL

      酶切质粒(50ng)              _ul

      酶切DNA片段(100ng)        _uL

      DDW                         20uL

      * 16℃连接8-10h,或者室温连接10min。


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