三、质粒提取

（二）收获细菌并裂解

      1.离心扩增好的菌液，按说明书将菌液重悬，转入1.5ml离心管中。

      2.用质粒小量抽提试剂盒，按说明书要求提取质粒。

      3.细菌高速离心1min,彻底去除上清。

      4.加入250ulRB溶液，振荡器充分悬浮细菌。

      5.加入250ulLB溶液。立即上下颠倒10次，使细菌裂解，室温，放置2min。

      6.加入250ulNB溶液。立即上下颠倒10次，使之充分中和，室温，放置2min。

      7.室温，1500rpm，高速离心15min。

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