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DNA纯化实验

DNA纯化可以:(1)获得高纯度的DNA;(2)浓缩DNA;(3)用于测序、遗传信息分析等分子生物学应用。

启动子质粒十

三、 质粒提取 (三) 质粒的纯化 附录: 1 OD260 和 OD280 的比值表示质粒的纯度。比值大于 1.8 ,说明纯化产物的纯度达到了 90% 。纯化好的质粒可用于转染实验,一般纯化步骤在细胞间

基因芯片技术二

由于所使用的标记物不同,因而相应的探测方法也各具特色。大多数研究者使用荧光标记物,也有一些研究者使用生物素标记,联合抗生物素结合物检测 DNA 化学发光。通过检测标记信

质粒的制备、提取四

二、 菌落制备主要环节 (二) 双酶切 将 PCR 回收产物和 pGL3-Basic 空载体同时进行双酶切。 1. 双酶切体系 (1) DNA 回收片段酶切的试剂和剂量如下: Xho Ⅰ 1ul Hind Ⅲ 1uL DNA 片段( 300

基因芯片技术五

(3) 采用了 CCD 相机的荧光显微镜 这种探测装置与以上的扫描方法都是基于荧光显微镜,但是以 CCD 相机作为信号接收器而不是光电倍增管,因而无须扫描传动平台。由于不是逐点激发

质粒的制备、提取十

三、 质粒提取 (三) 质粒的纯化 1. 将之前提取好的质粒放入 1.5ml 离心管中,加入 1/10 体积的 3mol/L 无菌乙酸钠溶液。 2. 加入 2 倍体积的无水乙醇,放置于 -20 ℃沉淀 4-6h 或过夜。 3

质粒的制备、提取九

三、 质粒提取 8、 将吸附柱放入收集管内,离心得到的上清转移至吸附柱,室温, 15000rpm ,高速离心 30s 。 9、 弃废液,将吸附柱放入收集管,加入 700ul WB 溶液到吸附柱中, 15000rpm ,

质粒的制备、提取八

三、 质粒提取 (二) 收获细菌并裂解 1. 离心扩增好的菌液,按说明书将菌液重悬,转入 1.5ml 离心管中。 2. 用质粒小量抽提试剂盒,按说明书要求提取质粒。 3. 细菌高速离心 1min, 彻

质粒的制备、提取七

三、 质粒提取 (一) 摇菌培养 1. 将鉴定测序正确的克隆菌液涂在 LB 固体平板。 2. 置于 37 ℃恒温培养箱,培养 12-17h ,待长出菌落。 3. 灭菌 15ml 离心管内加入 5ml 含抗生素的 LB 液体培

质粒的制备、提取六

二、 菌落制备主要环节 (四) 转化 1、 将感受态细胞 DH5ɑ 从 -80 ℃冰箱中取出,立即置于冰中,使其在冰中融化。 2、 连接产物加入 DH5ɑ感受态细胞溶液中,轻轻吹打使连接产物分布

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