实验方法原理

      组胺（histamine）可局部作用于H1受体，引起胃、肠道、气管、支气管平滑肌收缩。H1受体阻断药苯海拉明（diphenhydramine）对组胺具有竞争性拮抗作用，其作用强度可用拮抗参数（PA2值）来反映。当激动药与拮抗药合用时，拮抗药使两倍浓度的激动药仅产生原浓度激动药的反应水平，此时该拮抗药的摩尔浓度的负对数值为PA2值。本实验通过测定苯海拉明对组胺的拮抗参数PA2值，介绍了如何评价拮抗药的作用强度。

仪器、耗材

      磷酸组胺溶液   苯海拉明溶液   台氏液   BL-420微机型生物机能实验系统   恒温水浴箱   麦氏浴槽   张力换能器   手术器械   铁架台   培养皿   注射器

实验步骤

      1. 制备肠段　取豚鼠一只，击头处死，迅速剖腹，取出回肠，放入盛有台式液的培养皿中。用注射器吸取台式液，冲洗肠管至少三遍，将肠内容物清除。剪成约2 cm长肠段备用。

      2. 组胺的小肠收缩作用　将肠段两端结扎，一端固定在浴槽中，另一端固定于换能器上。浴槽中加入15ml台式液，恒温在37±0.5℃，通入氧气。待肠段稳定10 min后，记录一段基线。然后加入不同浓度组胺溶液（表23-1）。每次加完后，待肠管张力不再增加，方可加入下一次组胺溶液。记录收缩曲线。

      3. 苯海拉明的拮抗作用　用台式液冲洗浴槽三次，浴槽内溶液仍为15ml，加入10-5 mol/L苯海拉明0.2 ml，待肠管稳定5 min后，依上述方法加入不同浓度组胺溶液，记录收缩曲线。再次冲洗浴槽，加入5×10-5mol/L苯海拉明0.2 ml，待肠管稳定5 min，依上述方法加入不同浓度组胺溶液，记录收缩曲线。与上述类似，冲洗浴槽后，加入10-4 mol/L苯海拉明0.2ml，记录收缩曲线。

      4. 计算PA2值　可利用BL-420 微机型生物机能实验系统计算，亦可使用三点法、Scott比值法进行计算（详见参考书目）。

      （1）先测量组胞各累积浓度的收缩反应强度，然后以效能为百分之百计算

      （2）求出各浓度的反应百分率，以组胺终浓度为横坐标，反应百分率为纵坐标在微机或坐标纸上给出量曲线，从量曲线上分别求出拮抗剂前后激动剂引起50%反应所需约剂量（ED50），代入公式计算PA2值。

      PA2=log（E′/E-1）-logB

      E′：有拮抗剂时激动剂的ED50；

      E：无拮抗时激动剂的ED50；

      B：拮抗剂的摩尔浓度。

注意事项

      1. 制备肠段时，注意操作规范，尽量避免损伤，以免影响后续收缩功能的测定。

      2. 加入药量必须准确，药液可以直接加在浴槽内溶液的液面上。

此文转载来源：丁香通