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病毒的鸡胚培养
一、目的要求

      掌握鸡胚尿囊腔接种培养新城疫病毒的操作技术。



二、器材

      1.鸡胚 应选用健康鸡群的受精蛋,接种鸡的鸡胚应无母源抗体,以免影响病毒在胚胎中的增殖。实验用的鸡胚多采用9—10日龄的活胚。

      2.接种材料 新城疫I系疫苗

      3.各种器械 孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml结核菌素注射器、41/2号注射针头、镊子、3%碘酊、75%酒精棉球、铅笔、酒精灯、剪刀、眼科镊子、灭菌的疫苗瓶、灭菌滴管和固体石蜡等。



三、内容和方法

(一)接种前的准备

1.鸡胚的准备

      本实验选择9—10日龄的鸡胚,在照蛋时以铅笔勾划出气室,于气室稍下方胚胎活跃而血管明显的区域中,在血管之间的间隙划上记号,作为接种部位;用0、 1%新洁尔灭把蛋壳搽洗干净并抹干,再以2%碘酊对接种部位进行消毒,用75%酒精再擦一遍,在接种定位出打孔,气室向上竖放于蛋架上。

2.病毒接种材料的准备

      要分离培养的病毒材料应是无菌的,因此为达到材料无菌的目的,可在每ml接种物质中加青霉素和链霉素各100—500IU,置室温中1小时或冰箱中12—24小时处理。或经滤器除菌。

(二) 接种

     绒毛尿囊腔内注射:用6号针头的1ml注射器吸取新城疫病毒材料,针头从已打好的小孔中向鸡胚方向插入0.5—-1cm,注入0、1ml (相当0、5羽份),再加氧化锌胶布贴封,再加融化的固体石蜡封口,放回孵化箱中进行孵化,每天翻蛋两次,照视一次,24小时内死亡的舍去。

(三)收获

     新城疫I系病毒材料,在接种24—48小时即可收获。收获前应将鸡胚 置4度冰箱冷藏4小时或过夜,以免解剖时血管破裂。碘酒消毒蛋壳,用镊子去卵壳和尿囊膜,用吸头吸尿囊液于瓶内,可收集5-8ml,无菌检查,冰冻保存。


此文转载来源:丁香通



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