分子提取方法10

DNA提取

(一)培养细胞DNA提取

3、破碎细胞、释放核酸(二)

      (10)上清液移至一个新的1.5ml离心管中。

      (11)重复(7~102~3次,直至离心后液面间没有蛋白。

      (12)加入250ul氯仿,轻柔混匀1min,弃上清液。

      (13)12000rpm,室温,离心10min,弃上清液。

      (14)加入0.1×体积3mol/L NaAcpH 5.2,混匀。

      (15)加入2.2×体积-20℃预冷的无水乙醇,混匀。

      (16)-20℃,放置30min或过夜。

      (17)12000rpm,室温,离心10min

      (18)弃上清液,加入1ml预冷的70%乙醇洗涤2min

      (19)12000rpm,室温,离心10min

      (20)弃上清液,将残留尽量吸干。

      (21)室温,晾晒。

      (22)用适量TE或去离子水溶解DNA

      (23)定量、标记后-20℃保存。


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