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分子提取方法(八)

DNA提取

(一)培养细胞DNA提取

1、原理

    细胞裂解液中含有去污剂十二烷基硫酸钠(SDS),溶解细胞膜、核膜,破坏细胞并释放出来DNA。蛋白酶K是光谱蛋白酶,能在SDSEDTA存在下保持高活性。SDS破坏细胞,并将组氨酸从组蛋白分子中拆下,而EDTA能抑制DNase的活性,蛋白酶K将所有蛋白降解成为肽或小片段氨基酸,遂使DNA分子能完整的被分离出来,再用RNase去掉RNA、通过酚/氯仿反复抽提获得纯净DNA

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