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分子提取方法(十一)

DNA提取
(一)培养细胞DNA提取
3、破碎细胞、释放核酸(二)
(10)上清液移至一个新的1.5ml离心管中。
(11)重复(7)~(10)2~3次,直至离心后液面间没有蛋白。
(12)加入250ul氯仿,轻柔混匀1min,弃上清液。
(13)12000rpm,室温,离心10min,弃上清液。
(14)加入0.1×体积3mol/L NaAc(pH 5.2),混匀。
(15)加入2.2×体积-20℃预冷的无水乙醇,混匀。
(16)-20℃,放置30min或过夜。
(17)12000rpm,室温,离心10min。
(18)弃上清液,加入1ml预冷的70%乙醇洗涤2min。
(19)12000rpm,室温,离心10min。
(20)弃上清液,将残留尽量吸干。
(21)室温,晾晒。
(22)用适量TE或去离子水溶解DNA。
(23)定量、标记后-20℃保存。
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