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单细胞电泳技术(一)

      1 预先培养材料细胞,并处理准备实验用在载玻片,盖玻片。

      2 是眼前配置0.2%的常熔点琼脂糖凝胶,将溶液放入60摄氏度水浴中,每个载玻片放入溶液中3S,然后取出。将此载玻片水平放进37摄氏度温箱中,大于4h,即可使用。

      3 取处于对数期,生长良好的MCF-7细胞,至于不同剂量的UV下照射一段时间,若想观察细胞的DNA损伤修复情况,还可将部分细胞在培养箱中培养一段时间。可设置不同时间梯度来做对照实验。

      4 细胞消化后,离心富集,并用PBS液洗涤2-3次,清洗过程中要注意细胞要置于冰盒中,以抑制DNA损伤修复系统的持续作用,吹打细胞悬液不要过于激烈,以免细胞进一步受到机械损伤。最后用PBS液将其密度调整为1*106-2*106个细胞/m.l


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