微量免疫电泳实验
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-03-06
实验方法原理
免疫电泳法（immunoelect rophoresis）是把蛋白质电泳分离技术（琼脂电泳）和免疫学检测技术（双向扩散）结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高，灵敏度高， 时间短等优点， 是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临床诊断方面也有应用价值。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
电泳仪 水平电泳槽 打孔器 微量加样器 牙签 载玻片 恒温水浴 小刀
实验步骤
1. 琼脂板的铺制
如下图铺好琼脂板，然后按下图打孔划槽，电泳时不要把槽中的琼脂挑出来（槽的两纵向平行边先不划开）。
使琼脂板的上孔里充满抗原溶液，下孔里充满着指示蛋白。
3. 电泳
同上操作方法，调电流强度为2～4 mA/cm。当指示蛋白质到达滤纸的边缘时就可以停止电泳。一般需要40～60 min。
4. 扩散
电泳结束后，从琼脂板中间的槽里用牙签挑出琼脂凝胶，并加入免疫血清。将琼脂板置温盒内（或培养皿中），盖好盖子放置一夜。次日可以观察到凝胶内出现的沉淀线。一般情况下每一沉淀线即代表一种抗原成分。根据沉淀的数量、位置可以判断抗原的纯度以及抗原蛋白质的种类。微量免疫电泳常用于分析样品的血清成分。
5. 观察
免疫电泳的图谱可以直接观察到抗原抗体沉淀线，也可以用0.1%的氨基黑染色后观察。如果需要保存可以拍照。
此文转载：丁香通
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