琼脂扩散实验
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-02-28
单向琼脂扩散试验 是一种常用的定量检测抗原的方法。将适量稀释后的抗体与等量琼脂混匀，浇注成板，凝固后，在板上打孔，孔径3 mm，孔间距10 mm，孔中加入抗原，每孔10 μL，放置湿盒中，37℃温箱，抗原就会向孔的四周扩散，边扩散边与琼脂中的抗体结合
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 将适当稀释（事先滴定）的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。
2. 在免疫琼脂板上按一定距离（1.2~1.5厘米）打孔，见图1。
图1 单向琼脂扩散试验抗原孔位置示意图
1~5孔加参考血清，6~7孔加待检血清
3. 向孔内滴加1：2，1：4，1：8，1：16，1：32稀释的参考血清及1：10稀释的待检血清，每孔10微升，此时加入的抗原液面应与琼脂板一平，不得外溢。
4. 已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。
5. 测定各孔形成的沉淀环直径（mm），用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线，再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。
此文转载来源：丁香通
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