七、蛋白印迹实验常见问题及原因分析

1. 没有带？

原因：样品中抗原含量不足（抗原表达量过低；蛋白降解；上样量不足；样品制备错误）；制胶浓度比例不合适；转膜不完全；一抗稀释浓度过大；一抗与二抗不匹配；显色系统灵敏度不足。

 2. 非特异性杂带

原因：封闭或清洗不彻底；一抗浓度过高；蛋白降解；抗体的特异性差；蛋白形成二聚体；

转膜操作不当或干燥。