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制备抗肽抗体实验

制备抗肽抗体实验


  先将10mgBSA溶于0.5ml0.1mol/lpH6.8的磷酸钠缓冲液当中,放在一个2ml的玻璃试管中,加50μlMBS/DMF溶液,并在室温下温和搅拌30min的时间。加样到PD-10柱子上,上柱前用10ml的0.1mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液预平衡柱子。在上样后每0.6ml加I为一组分分部收集洗脱液,监测A280并收集第一个蛋白峰。汇集第一个峰的洗脱液于15ml的玻璃试管中。将10μmol的肽溶于20mmol/lEDTA中,终浓度约为1mg/ml。再把它加到装有MBS/BSA复合物的玻璃试管中。在室温下的氮气中振摇4h,于4℃对3lPBS透析过夜。然后换PBS后继续透析4h。最后将样品独立分装成小份,贮存在-20℃的环境中。


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