4. 带标签的SUMO的制备（以His-SUMO为例）

  （1）培养细胞、诱导及收获。

  （2）每200ml菌液收获的菌体加入5ml His裂解液，重悬沉淀。

  （3）冰浴条件下，超声破碎沉淀。

  （4）4℃，10000rpm，离心1h，

  （5）取上清液，加入Ni-NTA agarose，4℃，混合1-2h。

  （6）将混合物装柱用His洗涤液洗涤，直到检测不到蛋白浓度。

  （7）His洗脱液进行洗脱，按洗脱次序每管收集500ul。

  （8）考马斯亮蓝染色检测蛋白。

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