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探针的选择与标记

  1.DNARNA探针

  其原理是克隆一段特异的DNARNA片段,装载到相应的质粒中。经过质粒扩增,酶解和纯化等步骤,就可以得到大量的DNARNA片段。更好的解决办法是直接购买纯化好的探针,其次是获得一装载好特异性DNAcDNA片  段的质粒。目前在国际国内都有商品化的DNA探针供应,这些探针已经严格纯化和定量。

  2 寡核苷酸探针

  在待查基因序列已知的情况下,简单而又经济的用途是合成寡核苷酸探针,寡核苷酸探针的长度一般为10-100bp,探针越短,渗透性越好,但结合不太稳固。探针越长则合成成本上升,也没有必要。最好是长度20-30bp的寡核     苷酸探针。合成探针的时候可以掺入半抗原如地高辛、生物素和FITC等。寡核苷酸探针也可用3末端标记法予以标记。  

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