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DNA定量测定-Feulgen反应

实验背景与原理:

      DNA是主要的遗传物质,集中于染色体上。在真核细胞中DNA主要存在于细胞核中,在线粒体和叶绿体中也有少量分布。DNA的基本组成单位是脱氧核糖核酸,它由脱氧核糖、碱基和磷酸组成,通过与一些化学物质相互作用可产生有色反应,最终显示DNA在细胞中的存在部位及分布情况。

      Feulgen染色是经典的显示脱氧核糖核酸的的方法。其基本反应原理是标本经稀盐酸水解后,DNA分子中的嘌呤碱基被解离,从而在核糖的一端出现醛基。Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应,形成含醌基的化合物分子,因醌基为发色团,故可呈现出紫红色,即DNA经稀酸水解后产生的醛基,具有还原作用,可与无色品红结合形成紫红色化合物,从而显示出DNA的分布。

      DNA水解后的脱氧核糖的C-1位置释放的醛基可与席夫试剂反应显紫红色。细胞中只有DNA才具有这种专一的Feulgen反应,因此利用此反应可以鉴定DNA的存在。另外由于此反应对含有DNA的核结构显示细致、清晰、染色稳定,因此被广泛用于核及染色体的研究中

 

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