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miRNA检测

3. RT-PCR也被用来检测miRNA前体的表达水平, 其他基于PCR技术检测miRNA的方法有 引物延伸法,就是在引物的5 末端加一个特异标记,可以定量测定低丰度的RNA含量; 原位杂交技术(

核酸的抽提---mRNA的分离步骤

与rRNA 和tRNA 不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA 中分离mRNA dmonds等,1971;At Leder,1972)。

小鼠灌胃

小鼠灌胃方法比较简单,需要关注的只有两点:一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入,二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。

酶切反应建议

一、 建立一个标准的酶切反应 目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温

核酸透射电镜样品制备实验

很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜,在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层,由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸分子与该蛋白质单分子膜作用时会由于

PCR扩增产物的克隆3

为了减少自环的高本底,可对载体进行5’除磷酸处理,原理是连接酶只能连接DNA片断的3’OH末端与5’端,所以除磷后载体不会自环。一旦有外源片断插入时,由外源片断提供5’端就能与载体进

蛋白质免疫印迹(Western Blot )-底物化学发光 ECL 法

蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以: (1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质; (2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况; (3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋

基于BST-2的多肽B49抑制乳腺癌细胞黏附和生长

骨髓基质抗原2(BST-2)也被称为Tetherin,参与多种癌症的生长和进展。BST-2通过形成BST-2:BST-2二聚体,促进细胞与细胞和细胞与基质的粘附、细胞运动、存活和生长,最终实现促瘤效应。本研究的

细胞转染实验

细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。本实验室主要是质粒转染、miRcroRNA转染、慢病毒转染、药物转染、多

质粒转染细胞株基因检测 (miRNA靶基因验证)

实验共分以下3个主要步骤: 1. 质粒转染细胞;2.双报告基因检测;3. 统计学分析。

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