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ChIP染色质免疫沉淀技术3

细胞固定 甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质,蛋白质-DNA,蛋白质-RNA交联,形成生物复合体,防止细胞内组分的重新分布。甲醛的交联反应是完全可逆的,便于在后续步骤中对DNA和蛋白质进行分析

ChIP染色质免疫沉淀技术 2

染色质免疫沉淀技术的原理是:在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉

GST融合蛋白纯化方法

GST融合蛋白纯化方法

蛋白样品制备中各类杂质和杂蛋白的去除

蛋白样品制备中,在细胞破碎之后,既可以利用特定蛋白质的特性来分离某一类蛋白质,比如亲和纯化,比如前面介绍的磷酸化蛋白富集,或者膜蛋白富集;另外一个考虑方向是去除杂质----去

免疫共沉淀1

1.基础成分 (1)Tris-HCl(防止蛋白变性的缓冲液成分) (2)NaCl(防止非特异性蛋白聚集的盐分) (3)NP-40(用H2O配置成10%储存液。NP-40为非离子去污剂,用于提取蛋白) (4)去氧胆

蛋白质分离纯化的新技术及技术要点

本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术,综和近年来国内外的一些研究结果,结合实际应用的例子,分析了各

蛋白质相互作用的研究方法

虽然有一些蛋白质可以以单体的形式发挥作用,但是大部分的蛋白质都是和伴侣分子一起作用或是与其他蛋白质形成复合物来发挥作用的。因此,为了更好地理解细胞的生物学活性,必须很好地

蛋白质免疫印迹(Western Blot )-底物化学发光 ECL 法

蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以: (1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质; (2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况; (3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋

蛋白印迹法

电泳条件:电压 200V ,电流 8mA ,染料进入分离胶时电流增加到 16mA ,时间一般 2-3 小时。 * 溴酚蓝刚跑出胶即可终止电泳进行转膜,也可以根据时间经验停止电泳。 * 电泳后检测蛋白是

膜蛋白脂蛋白体

体外小麦胚系统+ 脂质体技术 亚诺法体外蛋白质表达系统以小麦胚真核翻译机制为基础开发而成。小麦胚将所有翻译所需的成分存储于干燥浓缩的状态,在胚芽开始成长时即进行蛋白质

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