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没有人能随随便便 WB 成功,WB问题整理来了

做了很久的 WB(western blot),走了很多弯路,其实发现 WB 想要做好并不难,总结了 WB 实验中可能会遇到的问题,分析了可能的原因及对应的解决方案,希望能成为你实验成功的基石。

提高蛋白质的稳定性方法

葡萄糖异构酶(GI)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,朱国萍等人在确定第138位甘氨酸(Gly138)为目标氨基酸后,用双引物法对GI基因进行体外定点诱变,以脯氨酸(Pro138)替代Gly

蛋白样品制备中各类杂质和杂蛋白的去除

蛋白样品制备中,在细胞破碎之后,既可以利用特定蛋白质的特性来分离某一类蛋白质,比如亲和纯化,比如前面介绍的磷酸化蛋白富集,或者膜蛋白富集;另外一个考虑方向是去除杂

蛋白质 Western Blot 低成本快速半干转印方法

随着半干转印系统不断进步,有越来越多的方法被应用于加速转印过程。例如,用户可以通过更换转印缓冲液、使用不同的转印装置,或调整转印条件、修改实验设计,从而缩短实验时

抗体和重组蛋白使用保存方法

无论是保存还是运输,请避免反复冻融。反复冻融,冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变,从而降低抗体的结合能力,也加快了抗体球

芯片分离蛋白

尽管现在所有的注意力都集中到了蛋白芯片的研究上,蛋白质组研究实验室的主流技术还是双向凝胶电泳。双向凝胶电泳在历史上由于其低通量、低重复性以及对于少量蛋白不易检出的

蛋白质相互作用的研究方法

举世瞩目的基因组计划使大量的新基因不断被发现,然而单纯的基组DNA序列尚不能解答许多生命问题。基因是相对静态的,而基因编码的产物-蛋白质则是动态的,具有时空性和调节性

人造锌指蛋白的设计和合成

人造锌指蛋白在生物医学研究和基因疗法中有重要应用,而且是生物化学和分子生物学研究的新工具 [ 1~3 ] 。特 别是(Cys) 2 (His) 2 型锌指模体(真核细胞中最常见的 DNA 结合模体)为新

分光光度计维护方法说明

分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度最常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。Jessica Geisler博士是

蛋白质盐析分离法

一、蛋白质 盐析分离的原理: 蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值时,其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓

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