PVDF膜上蛋白的可逆染色

Western 杂交时,为确认蛋白是否转至 PVDF 膜上,可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。 1. 氨基黑染色 染液: 0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid. 染色:将 PVDF 膜置于

分子提取方法

蛋白提取 组织样本总蛋白提取(小鼠肝组织) 1、 颈椎脱臼处死小鼠, 75% 乙醇擦拭皮肤,剪开腹腔,剪切肝脏组织。 2、 平皿中放入 6ml 预冷 0.9%NaCL 。 3、 称取 0.6g 左右肝组织,在平

高效液相色谱之高效反相液相色谱

反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大

蛋白质纯化胶体过滤法

不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的 partition 色析法( Pharmacia 操作手册, Gel Filtration )。 仪器设备:色析管柱( Pharmacia C column, 1.6

蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

[ 原理 ] 蛋白质在十二烷基硫酸钠( SDS )和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按 1.4gSDS/1g 蛋白质比例的 SDS- 蛋白质多肽复合物,该复合物带负电,故可在聚丙

蛋白质染色实验

凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便且快捷,而银染法具有相当高的灵敏度,能用于检出更少量的蛋白质。 考马斯亮蓝染色 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

免疫球蛋白提取技术

免疫球蛋白( Immunoglobulin Ig )的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着 B 细胞的功能,因此测定血清 Ig 含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的 Ig 的过高和

蛋白质测序

一、概念 当前,所谓蛋白质测序,主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构 (Primary structure) 包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链

PPO粗酶液的纯化

一、原理 1. 葡聚糖凝胶 SephadexG-200 凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小

双向电泳实验

双向电泳( twodimentionlalgel electrophoresis, 2-DE ) 技术,特别是以固相 pH 梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨率最高,信息量最大的电泳技术。 ISO-DALT 方法 试剂、试剂盒 尿素

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