蛋白质染色实验
发布人:管理员 浏览次数: 发布时间:2017-03-09
凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便且快捷,而银染法具有相当高的灵敏度,能用于检出更少量的蛋白质。
考马斯亮蓝染色
实验材料
蛋白质
试剂、试剂盒
聚丙烯酰胺凝胶固定液染色液脱色液
仪器、耗材
滤纸培养箱
实验步骤
1. 将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以3~5倍体积的固定液覆盖,在旋转摇床中缓慢揺动2 h。
2. 倾去固定液,以考马斯亮蓝染色液覆盖凝胶,并缓慢摇动4 h。
3. 倾去染色液,用约50 ml 固定液冲洗凝胶。
4. 倾去固定液,以脱色液覆盖凝胶,缓慢摇动2 h,倾去脱色液,再加入新脱色液同时至获得蓝色条带及干净的背景。凝胶可放置在乙酸或水中保存。
5. 需要时,给凝胶拍照。
6. 另外,也可将凝胶放在两张Whatman 3MM 滤纸上,顶上盖上塑料保鲜膜。在常规的凝胶干燥机中于80℃干燥1~2 h。
此文转载:丁香通
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