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poly(A)+ RNA的制备实验

大多数的信使RNAmRNA)都带有polyA)尾,而结构RNA没有。使用本工作方案,可以将带polyA)的RNArRNAtRNA中分离出来。

 

基本方案


实验材料: RNA


试剂、试剂盒:  NaOH寡聚脱氧胸苷纤维素polyA)样品缓冲液LiClEDTATE乙酸钠


仪器、耗材: 离心机分光光度计摇床


实验步骤        


1.  先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的层析柱,然后用水冲洗。

 

2.  0.5 g oligodT)纤维素干粉加1 ml 0.1 mol/l NaOH中,倒入柱内,以约10 ml 水冲洗。

 

3.  10~20 ml 加样缓冲液平衡柱子,至流出液pH7.5

 

70℃加热含2 mg RNA的水溶液10 min,再用10 mol/l LiCl调节溶液中LiCl至终浓度0.5 mol/l

 

5.  RNA溶液至oligodT)柱,并以1 ml polyA)加样缓冲液洗涤,将流出液重新上柱2次以上。

来源:丁香通

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