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miRNA实时荧光定量PCR检测试剂
miRNA参与许多生物学活动,其异常表达与不可治愈的疾病有关,是一类很有前途的标志物。有许多PCR方法分析miRNA的表达水平。基于自有专利技术,美国Signosis公司开发了一种高灵敏、高分辨的实时PCR方法,用于检测miRNA的表达,其应用寡核苷酸连接和基于实时PCR的SYBR green。该方法可用于总RNA或细胞裂解物中的miRNA表达的定量分析,无需进行cDNA转换。
A. 优点:
·便利——试剂盒包含了从细胞裂解到PCR所有试剂
·无需RNA制备——细胞裂解物可直接用于反转录,尽管用总RNA更好
·实时——分析可以实时监测
B. 原理:

        该方法中,靶miRNA分子与二对oligo连接,形成RNA/DNA复合物。当序列完全匹配时,这二对oligo与miRNA连接,二对oligo的节点通过DNA酶连接。miRNA之间单个寡核苷酸的差异就会阻止杂交或连接。寡核苷酸对连接上后,连接分子可进行实时PCR。
 



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