RNA 分离的酚基试剂的生产以 Chomczynski 方案为基础。这些方案在从富含 RNA 酶的组织如胰腺中获取 RNA 时最有用。这里介绍的是随 Invitrogen 的 Trizol 试剂出售的方案的摘要，经 Invitrogen 允许做了修改。

实验材料         

磨细的组织

试剂、试剂盒         

Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水

实验步骤 

一、材料

1. 缓冲液、溶液和试剂

Trizol(Invitrogen)

氯仿

异丙醇

乙醇，75%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水配制

DEPC 处理过的水

2. 细胞和组织

50~100 mg 已磨细的组织

二、方法

1. 将 lmlTrizol 加到含 50〜100 mg 磨细组织的微董离心管中。室温下温育 5 min。

组织被磨细有助于 Trizol 将其裂解，这一点很重要。

2. 加 200ul 氯仿，将管颠倒数次以混合。

不推荐进行振荡，因之可导致基因组 DNA 的剪切和 RNA 制备物中 DNA 污染过多。

3. 室温温育 3 min，1500 g 离心 15 min。

4. 将液相转移到一新管。加 500ul 异丙酵。室温温育 l0 min。

5.1500 g 离心 l0miri。RNA 将可见于管底。

6. 移弃上清，小心避免扰动沉降物。

7. 加 1 ml75% 的乙醇。重悬 RNA。4°C 下 1500 g 离心 5 min。

8. 移弃乙醇并风干 RNA。

9.RNA 溶解于 DEPC 处理过的水中。

当使用以酚为基础的试剂时，为得到足够高的纯度，对得到的 RNA 进行笫二轮酚-氯仿抽提可能是必

要的。

此文转载来源：丁香通