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利用 Marligen 总 RNA 快速纯化系统纯化总 RNA 实验

Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可从各种样品中提取 RNA,且产量和质量非常稳定。


试剂、试剂盒         


乙醇β-巯基乙醇


仪器、耗材     


转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System


实验步骤   

     

一、材料

 

1.缓冲液、溶液和试剂

 

乙醇,70%100%

 

β-巯基乙醇

 

2.特殊设备

 

转子-定子均化器或类似设备

 

3.其他

 

Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)

 

二、方法

 

(1)加β-巯基乙醇制备裂解溶液。

 

(2)按照厂商的方案要求,向细胞和组织样品中加裂解溶液(裂解液体积取决于所处理样品的大小)。用转子-定子均化器或类似设备均化。

 

(3)向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。

 

(4)将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中,在微量离心机中12000~16000g离心。


(5)用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次,12000~16000g离心1min

 

(6)用洗涤缓冲液2洗涤两次,每次500ul,12000~16000g离心1min

 

(712000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。

 

(8)参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱,样品较多可用20ul水洗脱。






此文转载来源:丁香通

 

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