大鼠疑似泰勒氏病毒荧光定量检测方法的建立-【动物实验】
发布人:管理员 浏览次数: 发布时间:2021-05-20
目的:临床快速准确地检测大鼠可疑的泰勒样大鼠病毒(TLV),特别是通过TaqMan探针荧光定量聚合酶链反应(qPCR)技术检测TLV病毒核酸,建立一种方法。
方法:使用基因合成序列作为质粒标准品的模板,选择3622-3729nt的特定序列,设计引物-TaqMan探针对,优化反应体系和条件,并进行qPCR扩增,建立TLV TaqMan。我们评估了探针qPCR方法及其灵敏度,稳定性和特异性。
结果:已建立的TLVqPCR检测方法与校正曲线具有良好的线性关系,R2值为0.99,灵敏度最低。它可以检测10个拷贝/μL。这是常用的PCR方法;鼠病毒没有非特异性反应,具有良好的可重复性,并且批内和批间变异系数小于1%。
结论:TaqMan探针用于建立荧光定量PCR方法以快速检测TLV。该方法易于操作,高度灵敏且高度特异性。
分享到: