体外SUMO修饰实验（三）
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-09-15
3.SUMO质粒瞬时转染
（1）将生长状态良好的细胞接种于直径4-6cm的培养皿中，5% CO2，37℃培养箱内培养16-24h，细胞融合至60%-90%时可进行转染。
（2）转染前1h将细胞培养液换成不含抗生素的培养液。
（3）用Opti-EME培养液稀释4倍的Lipo2000试剂。
（4）用Opti-EME培养液稀释SUMO质粒。
（5）将上两步溶液按1:1比例混合配成转染复合液，室温，孵育20min。
（6）将已接种细胞的培养皿中加入200ul转染复合液，充分混匀。
（7）继续培养4-6h，更换正常培养液。
（8）培养24-72h，镜下观察和检测带有荧光标记的SUMO质粒的表达。
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