利用 Trizol 从植物组织中制备 RNA 实验
下述方案是经修改过的 Trizol 方案，用于从植物组织中分离 RNA，其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤，以选择性地沉淀 RNA，而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。
直接原位PCR
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通
实时荧光定量PCR2
内参照法： 在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内
实时荧光定量PCR3
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结
PCR扩增产物的克隆3
为了减少自环的高本底，可对载体进行5’除磷酸处理，原理是连接酶只能连接DNA片断的3’OH末端与5’端，所以除磷后载体不会自环。一旦有外源片断插入时，由外源片断提供5’端就能与载体进
聚合酶链式反应(PCR)4
一、 PCR反应的关键环节 1. 模板核酸的制备。 2. 引物的质量与特异性。 3. 酶的质量。 4. PCR循环条件。 二、 PCR常见问题及对策 1. 假阴性，不出现扩增条带 （1）模板原因 ① 模板中含有
聚合酶链式反应(PCR)3
注意事项 1. 由于PCR反应灵敏度很高，因此要特别主意防止DNA污染的发生。样品间的相互污染可能产生假阳性结果，特别是将PCR技术应用到临床病原菌感染确定中。 2. 如果是公用的、没
交叉引物恒温扩增技术
核酸扩增是核酸分子诊断的关键技术。根据核酸扩增反应中温度变化要求，可以将核酸扩增技术分为两大类：一类是PCR核酸扩增技术，另一类是核酸恒温扩增技术。 PCR技术是指通过控制
PCR扩增产物的克隆
实验方法原理 平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头；PCR产物纯化后，可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min（利用该酶所具有的
巢式PCR
实验方法原理 由于巢式PCR反应有两次PCR扩增，从而降低了扩增多个靶位点的可能性（因为与两套引物都互补的引物很少）增加了检测的敏感性；又有两对PCR引物与检测模板的配对，增加
