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间接免疫荧光法的注意事项

•  荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长 ,会使荧光减弱。

•  每次试验时 ,需设置以下三种对照:

–  阳性对照:阳性血清+荧光标记物

–  阴性对照:阴性血清+荧光标记物

–  荧光标记物对照:PBS+荧光标记物

•  标本片需在操作的各个步骤中,始终保持湿润,避免干燥。

•  一抗和二抗应始终保持在标本片上,避免因放置不平使液体流失,从而造成非特异性荧光染色。

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