人NFkB调控相关cDNA微孔板阵列检测试剂
  生物学功能是由启动表达和关闭表达的基因控制的。基因表达的改变与人类的许多疾病相关。基因芯片等分子检测技术为同时检测数千种基因表达提供了高通量的方法。这些方法已经应用于各种生物样本和各种疾病的样本,通过比较基因表达鉴别出差异表达的基因,将这些差异表达的基因抽提出来,用做检测生物过程和疾病状态的基因组。NFkB 是一种广泛存在的转录因子,在细胞对各种刺激的反应中起着重要作用,这些刺激包括:压力、细胞因子、自由基、紫外线照射、氧化的LDL、细菌和病毒的抗原。NFkB的异常调节与癌症、炎症、自身免疫性疾病、脓毒性休克、病毒感染和不适当的免疫进展相关联。NFkB激活时,与其抑制剂IkB解离,从细胞质移到细胞核,在此与靶DNA 结合,正调节基因的转录,参与免疫和炎症反应、细胞调节以及凋亡。美国Signosis公司研发的cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20多种NFkB调节基因表达。
A. 优点:
操作简单——做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单
灵敏度高——检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测
定量对比——二个或以上样品基因表达的差异可定量分析
B. 原理:
        美国Signosis公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。


此文转载来源:丁香通




 
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