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以新鲜动物组织为材料对细胞中酸性磷酸酶的定位

实验方法与步骤:

      1 动物新鲜组织低温恒冷切片,片厚6μm,冷丙酮固定10min

      2 把切片置于酸性磷酸酶工作液中(预热至37℃),37℃处理0.5-1h

      3 蒸馏水洗3次,每次1min

      4 1%冰乙酸液处理3min

      5 蒸馏水浸洗2次,每次1min

      6 2%硫化铵液处理3-5min

      7 流水冲洗数分钟,蒸馏水洗3遍。

      8 1:30的吉姆萨染液染色15min

      9 封片

      10 镜检


细胞中酸性磷酸酶的定位

注意事项:

      1 孵育液必须现配先用。

      2 当铅离子浓度过低时,产生的磷酸离子不能完全被结合而发生弥散,并可进入细胞核,会造成染色假阳性。

      3 孵育时间过长也可能发生酶扩散和细胞核染色现象。


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