苏木精/伊红染色实验

      这种染色方法的基础是组织结构对不同染料的结合程度不同。染料苏木精可以将嗜碱性结构染成蓝紫色,而伊红可以将嗜酸性结构染成粉红色。嗜碱性结构通常包括含有核酸的部分,如核糖体、细胞核及细胞质中富含核糖核酸(RNA)的区域等。


实验材料

      载玻片


试剂、试剂盒

      苏木精染料   氢氧化铵   伊红染料


仪器、耗材

       水浴锅   培养箱


实验步骤

      1.  将显影过的载玻片(在玻片架中)放入盛有水的染色盘中。
      2.  按编号在染色盘中准备以下各组液体。
      (1)苏木精染液
      (2)水
      (3)水
      (4)0.1% NH4OH
      (5)水
      (6)水
      (7)伊红染液
      (8)95%乙醇
      (9)100%乙醇
      (10)100%乙醇
      (11)二甲苯
      (12)二甲苯
      (13) 二甲苯
       3.  在苏木精染液中染玻片20~30 s(勿染过深),水中浸泡2次,每次2 min。
       4.  快速浸于0.1%氢氧化铵,然后浸入水中。
       5.  以水浸洗5 min,然后用伊红染色20~30 s。 ‘
       6.  在同一盛95%乙醇的盘中,浸冼玻片8次,然后,于100%乙醇中浸8次,再置100%乙醇中2 min 使完全脱色,在二甲苯中平衡3次,每次2 min。
 
 
图一、用固片截止固定载玻片示意图


      7.  按基本方案1,步骤5~9操作,进行固片处理。



注意事项


      1.  如在0.1%氢氧化铵中浸泡时间过长,放射自显影乳胶会从玻片上脱离。

      2.  如染色过深,可将玻片浸于50%乙醇中,脱色片刻(观察染料扩散状况),如染色过弱,可再染色。

 

此文转载:丁香通


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