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荧光素酶及其报告基因的应用和检测(四)

三 荧光素酶报告基因 2 报告基因简单实验流程 构建包含有报告基因的质粒 将构建好的质粒转染细胞 提供相应的刺激(诱导) 检测报告基因 数据分析 3 荧光素酶作为报告基因的优势

细胞凋亡诱导

细胞凋亡的诱导:HeLa细胞常规传代培养至对数生长期(见细胞传代培养)。实验组细胞加入顺铂溶液(生理盐水配置)至终浓度为20μmo1/L,37℃,5% CO2条件下继续培养。空白实验对照加入等体积的

细胞冻存

细胞冻存 1 培养室实验准备工作大致同细胞传代培养的前 6 个步骤。简言之:用紫外消毒等消毒超净工作台面;清洗消毒手部;观察细胞;预热培养用液;点燃酒精灯;取出巴斯德吸管

蛋白质检测十二

七、蛋白印迹实验常见问题及原因分析 1. 没有带? 原因:样品中抗原含量不足(抗原表达量过低;蛋白降解;上样量不足;样品制备错误);制胶浓度比例不合适;转膜不完全;一抗

动物生理学实验设计九

静脉注射和口服等量生理盐水对小白鼠尿量的影响 实验目的: 通过对小白鼠注射和口服等量生理盐水,了解尿液生 成过程,进一步熟悉掌握肾小管的功能。 六、 方法与步骤: 1、 小

DNA定量测定-Feulgen反应一

实验步骤 1.切片经脱蜡入水。 2. 用 1mol/L HCl 浸洗。 3. 切片放入 60 ℃预热的 1mol/L HCl 内 8min 。 4. 室温下 1mol/L HCl 浸洗。 5. 蒸馏水浸洗 2 次,每次 5min. 6. 加入席夫液,于室温反应 30-60

微卫星不稳定性的检测六

3. 判断标准:分析电泳图谱, MI 表现为肿瘤组织相对于正常组织出现额外的条带、等位带产生迁移率的改变或等位带浓度增加。在检测的 6 个微卫星位点中,如果有两个或两个以上位点

免疫组织化学反应结果的判断标准

免疫组织化学技术自开展以来日益受到人们的重视 , 已被广泛地运用在病理诊断及研究领域。敏感的免疫酶标过氧化物酶一抗过氧化物酶 (PAP) 法和亲和素一生物素一过氧化物酶复合物

ChIP染色质免疫沉淀技术

ChIP 技术的应用 染色质免疫沉淀技术还可用于分析两种蛋白共同结合的 DNA 序列,即 ChIP reChIP 方法。 ChIP reChIP 是在第一次 ChIP 的基础上不解交联,而继续进行另一个目的蛋白的免疫沉淀

荧光素酶及其报告基因的应用和检测

二 荧光素酶 荧光素酶( Luciferase )是生物体内催化荧光素 (luciferin) 或脂肪醛 (firefly aldehyde) 氧化发光的一类酶的总称 , 来自于自然界能够发光的生物。 自然界存在的荧光素酶来自萤火

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