Chelex-100法提取微量DNA

Chelex-100法提取微量DNA 1. Add 1/50 volume of Proteinase K (10 mg/mL) and incubate the sampleat 65C for 2 hrs to overnight. 2. 200 uL 5% Chexlex-100,add 10 uL proteinase K (20 mg/mL),inculate 2hrs in 37 C. 3. 50ulChelex液及lfl蛋白酶

核酸原位杂交技术

分子生物学技术的突飞猛进发展,也推动了病理学的进展。原位杂交技术时分子生物学领域中最常用的基本技术方法之一,是核酸分子杂交技术中的一种。 核酸原位杂交技术最早应用于

RNA实验操作中的一般要求

在所有RNA实验中,最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存

细菌基因组提取方法!

细菌基因组DNA的提取方法综述 1 快速微量提取法 A.取1.5ml菌体培养物于一灭菌Ep管中,12000rpm离心1min, 丢去上清夜,收集菌体。 B.加入400ul裂解液(40mMTris-醋酸,20mM醋酸钠,1mMEDTA,1%SDS,pH7

Northern杂交分析

【操作】 1.RNA的提取见前。 2.变性胶的制备:取琼脂糖0.2g,加入DEPCH2O12.4ml,加热熔化,冷却至60℃时加入5甲醛凝胶电泳缓冲溶液4.0、37%甲醛3.6ml、混匀、制胶。待胶凝固后,置于1甲

DNA平端连接注意事项

T4噬菌体DNA连接酶不同于大肠杆菌DNA连接酶,它可以催化平端DNA片段的连接(Sgaramella和Khorana,1972;Sgaramella和Ehrlich,1978),由于DNA很容易成为平端,所以这是一个极为有用的酶学物性。有

DNA芯片检测siRNA专一性

长片断的双链RNA (dsRNA) 导入例如植物,真菌,果蝇,线虫等 生物 的细胞中会引发同源mRNA的降解这就是所谓的RNA interference (RNAi)。RNAi分两个步骤,首先是长片断双链dsRNAs被核酶Dicer切割

RNA印迹杂交

Northern印迹的制备 预备: 1.按下述步骤,每泳道加10~20g总RNA或0.5~1gpoly(A)+RNA进行甲醛/琼脂糖凝胶电泳,将凝胶放在紫外线透照仪上,旁边置一标尺进行拍照。 a.总RNA(10~20g)用下

miRNA和siRNA的基本介绍及区别

1998年,Andrew Fire和Craig Mello提出了一项新技术:通过dsRNA诱导特异基因的沉默,即所谓RNAi。2000年,Amy Pasquinelli等将lin-4和let-7作小时序RNAs(stRNAs,mall temporal RNAs)。 RNA干涉(RNAi)在实验室

RNA操作注意事项与实验技巧

操作注意事项: 由于RNA酶的广泛存在与难以灭活的顽固特性。使得RNA的提取纯化和后续工作变得非常困难。为了保证RNA的研究工作成功,请仔细阅读下列注意事项,相信它能帮助您解决

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